マスターミックス計算ツール

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ステップ 1

反応数・液量・余剰分を設定

ステップ 2

試薬と液量を追加

ステップ 3

ピペッティング合計を確認

ステップ 4

コピーまたは保存(ログイン)

オンラインマスターミックス計算ツール

PCRのピペッティング量をすぐに知りたいときは、ウェブサイトをご利用ください。8、24、96反応分に余剰分を加えた各試薬の量と、補充する水の量がすぐにわかります。インストールもアカウントも不要です。ログインすると、保存したミックスを Lab Laps モバイルアプリと同期できます。

試薬量とピペッティング合計を表示する Lab Laps マスターミックス計算ツール

PCRマスターミックスの計算方法

この無料のオンラインマスターミックス計算ツールは、反応組成をそのままベンチで使えるピペッティング量に変換します。必要な反応数、1反応あたりの液量(PCRでは20 µLや25 µLが一般的で、分取用には50 µL)、余剰分をパーセントまたは追加反応数で設定します。各試薬を1反応あたりの液量とともに追加し、必要に応じて原液濃度を入力すると反応中の終濃度も確認できます。ミックスに加える各試薬の合計量を算出し、残りを水または他の溶媒で補充して、すべてのチューブが目標液量になるようにします。通常のPCR、qPCR、RT-PCR、制限酵素処理、ライゲーションなど、複数の試薬を多数のチューブにスケールアップするあらゆる反応系に使えます。

使い方

  1. 1反応数、1反応あたりの液量、余剰分を入力します。
  2. 2各試薬を1反応あたりの必要量とともに追加します。
  3. 3ベンチで試薬をチェックしながら進めるか、表をコピーするか、ログインして保存内容を同期します。

対象ユーザー

PCR、qPCR、クローニング反応などの複数試薬のミックスを調製する分子生物学・生化学のラボ向けです。実験のたびに同じスプレッドシートを作り直すことなく、ピペッティング合計を知りたい学生や研究者に最適です。

マスターミックス計算ツールのよくある質問

PCRマスターミックスはどのように計算しますか?

各試薬の1反応あたりの液量に反応数を掛け、ピペッティングのロスで最後のチューブが足りなくならないよう少し余剰分を加えます。この計算ツールはその両方を行います。反応数、1反応あたりの液量、余剰分を入力し、各試薬を1反応あたりの必要量とともに追加してください。ミックスに加える各試薬の合計量と、最終反応液量にするために必要な水の量が表示されます。

PCRマスターミックスには何を入れますか?

一般的なPCRマスターミックスには、バッファー(MgCl2を含むことが多い)、dNTPs、フォワードプライマーとリバースプライマー、DNAポリメラーゼ、ヌクレアーゼフリー水が含まれます。鋳型DNAは通常含めません。共通の試薬をそれぞれ1行として追加すると、設定した反応数に合わせてすべてまとめてスケーリングされます。

鋳型DNAはマスターミックスに加えますか?

通常は加えません。鋳型は各チューブに個別に分注し、それぞれの反応に固有のサンプルが入るようにします。それこそがマスターミックスを使う目的です。テクニカルレプリケートのプレートなど、すべての反応で同じ鋳型を使う場合に限り、鋳型を試薬の行として追加してください。

マスターミックスの余剰分はどのくらい見込むべきですか?

一般的には5〜10%程度の余剰分を見込みます。少量のバッチではパーセント指定だとほとんど増えないため、代わりに1〜2反応分を丸ごと追加するラボも多くあります。この計算ツールはパーセント指定と追加反応数の固定指定のどちらにも対応し、ミックス内のすべての試薬に適用します。

このマスターミックス計算ツールは無料ですか?

はい。公開版のマスターミックス計算ツールは無料で、ログインも不要です。必要な反応数、1反応あたりの液量、必要に応じて余剰分を入力し、試薬を追加すれば、ピペッティングする合計量がすぐにわかります。インストールもアカウント作成も必要ありません。

原液から終濃度を計算できますか?

はい。1反応あたりの液量の横に原液濃度を入力すると、その試薬の反応中の終濃度が表示されます。0.2 µMのプライマー、dNTPs、MgCl2、10xバッファーなどの確認に便利です。

マスターミックス計算ツールはどの単位に対応していますか?

液量はnL、µL、mL、Lに対応しています。原液濃度はモル単位(M、mM、µM、nM)、質量/体積単位(ng/µL、ng/mL、µg/µL、µg/mL、mg/mL、g/L)、パーセント、10xなどの倍濃度に対応しています。同じ反応系内で試薬ごとに異なる単位を使っても問題ありません。

ピペッティング表はコピーできますか?

はい。「表をコピー」を使うと、試薬名と合計量をクリップボードにコピーして、実験ノートやスプレッドシートに貼り付けられます。また、ピペッティングしながら試薬にチェックを入れられるので、途中でどこまで加えたか分からなくなることもありません。

このページでマスターミックスのレシピは保存されますか?

いいえ。この公開ページでは、レシピはブラウザのタブ内にのみ保持され、アカウントには保存されません。Lab Laps モバイルアプリと同期できるミックスを保存するには、ログインして /app/master-mix をご利用ください。

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