Calculadora de master mix

Carregando…

Passo 1

Defina reações, volume e excedente

Passo 2

Adicione reagentes e volumes

Passo 3

Leia os totais para pipetar

Passo 4

Copie ou salve (com login)

Calculadora de master mix online

Use o site quando precisar rapidinho dos volumes de pipetagem para PCR: quanto de cada reagente para 8, 24 ou 96 reações mais o excedente, e quanta água para completar. Sem instalar nada, sem conta. Entre na sua conta para manter os mixes salvos sincronizados com o app Lab Laps.

Calculadora de master mix do Lab Laps com volumes de reagentes e totais de pipetagem

Como calcular um master mix de PCR

Esta calculadora de master mix online e grátis transforma a receita de uma reação em volumes prontos para pipetar na bancada. Defina quantas reações você precisa, o volume de cada uma (20 µL e 25 µL são os volumes de PCR mais comuns, 50 µL para reações preparativas) e o excedente em porcentagem ou como reações extras. Adicione cada reagente com o volume por reação e, se quiser, a concentração do estoque para ver a concentração final na reação. A ferramenta mostra o volume total de cada reagente a pipetar no mix e completa o restante com água ou outro solvente para que cada tubo chegue ao volume final. Funciona para PCR convencional, qPCR, RT-PCR, digestões de restrição, ligações e qualquer outra reação com vários reagentes que você precise escalar para muitos tubos.

Como funciona

  1. 1Informe o número de reações, o volume por reação e o excedente.
  2. 2Adicione cada reagente com o volume necessário por reação.
  3. 3Marque os reagentes na bancada, copie a tabela ou entre na sua conta para sincronizar.

Para quem é?

Laboratórios de biologia molecular e bioquímica que montam PCR, qPCR, reações de clonagem e outros mixes com vários reagentes: estudantes e pesquisadores que querem os totais de pipetagem sem refazer a mesma planilha a cada experimento.

Perguntas frequentes sobre a calculadora de master mix

Como calcular um master mix de PCR?

Multiplique o volume de cada reagente por reação pelo número de reações e adicione um pouco de excedente para que a perda na pipetagem não deixe faltar volume no último tubo. Esta calculadora faz as duas etapas: informe o número de reações, o volume por reação e o excedente e depois adicione cada reagente com o volume necessário por reação. Você obtém o volume total de cada reagente a pipetar no mix, além da água necessária para chegar ao volume final da reação.

O que vai em um master mix de PCR?

Um master mix de PCR padrão contém tampão (muitas vezes com MgCl2), dNTPs, primers forward e reverse, DNA polimerase e água livre de nucleases. O DNA molde normalmente fica de fora. Adicione cada reagente comum como uma linha aqui e a calculadora ajusta todos juntos para o número de reações que você está montando.

O DNA molde entra no master mix?

Normalmente não. O molde é pipetado separadamente em cada tubo para que cada reação receba sua própria amostra: essa é a ideia do master mix. Adicione o molde como linha de reagente só quando todas as reações usarem o mesmo molde, por exemplo em uma placa de réplicas técnicas.

Quanto excedente devo colocar em um master mix?

O comum é algo entre 5 e 10% a mais. Em lotes pequenos uma porcentagem quase não faz diferença, então muitos laboratórios adicionam uma ou duas reações inteiras a mais. Esta calculadora aceita as duas opções, excedente em porcentagem ou um número fixo de reações extras, e aplica a todos os reagentes do mix.

Esta calculadora de master mix é grátis?

Sim. A calculadora pública de master mix é grátis e não exige login. Informe quantas reações você precisa, o volume por reação e o excedente opcional, adicione seus reagentes e veja o volume total a pipetar: nada para instalar e nenhuma conta para criar.

Posso calcular concentrações finais a partir do estoque?

Sim. Informe a concentração do estoque ao lado do volume por reação e a calculadora mostra a concentração final daquele reagente na reação, útil para conferir primers a 0,2 µM, dNTPs, MgCl2 ou um tampão 10x.

Quais unidades a calculadora de master mix aceita?

Volumes em nL, µL, mL e L. Concentrações do estoque em unidades molares (M, mM, µM, nM), massa/volume (ng/µL, ng/mL, µg/µL, µg/mL, mg/mL, g/L), porcentagem e estoques concentrados como 10x. Dá para misturar tipos de unidade entre reagentes do mesmo mix.

Posso copiar a tabela de pipetagem?

Sim. Use “Copiar tabela” para levar nomes dos reagentes e totais para a área de transferência, para o caderno de laboratório ou uma planilha. Você também pode marcar os reagentes conforme pipeta para não se perder no meio do mix.

Esta página salva minhas receitas de master mix?

Não. Esta página pública mantém sua receita apenas na aba do navegador: nada é salvo em uma conta. Para mixes salvos que sincronizam com o app Lab Laps, entre na sua conta e use /app/master-mix.

Lab Laps

Baixe o Lab Laps e tenha seus timers, protocolos e ferramentas juntos em um só app.